천연색소를 이용한 형질전환식물체 선발기술을 개발하였다. 식물유래의 안토시아닌 색소합성 전사인자 2종을 애기장대와 옥수수로부터 분리하고, 두개의 전사인자를 이용하여 co-transformation을 수행하고, 효율적인 형질전환을 위한 공동배양기간, 접종농도 등을 확인하였다. 모델 식물체인 담배에 형질전환하여 형질전환체를 선발하고, 이들을 자식시켜 후대를 획득하였다. 후대에서 원하는 유전자만이 도입된 개체를 선발하고자 agroinfilteration을 수행하여 확인하였고, 분자생물학적인 유전자형 진단방법과 비교하여 본 실험의 정확성을 판단하였다.
효율성 높고 간편한 선발마커-프리(marker free) 형질전환 식물체 제조를 위해 스트레스 유도성 프로모터에 특이적 재조합효소 유전자인 FLP의 발현을 유도하여 선발마커를 제거할 수 있는 벡터를 제조하였다. 과산화수소가 첨가된 배지에서 재분화 과정을 거쳐 선발된 재분화 형질전환 식물체들을 분자생물학적 실험 방법을 이용하여 확인한 결과 FLP와 hpt 유전자들이 완전히 제거된 것을 확인할 수 있었다. 과산화수소 첨가 배지에서 재분화체의 마커제거 효율은 약 13～41%로 나타났다.
작성일:2009-10-26 09:51:59 152.99.82.30